Substrat fluorogénique ANSN de la thrombine

PM(g/mol) : 750,9
Km FIIa : 17 µM - Kcat : 58 s-¹
Km FXa : 100 µM - Kcat : 0,31 s-¹
Km PCa : 40 µM - Kcat : 2,2 s-¹
Km t-PA : 47 µM - Kcat : 0,011 s-¹

Les propriétés cinétiques identifiées aideront à la sélection d’un substrat approprié.
Les substrats ANSN sont fournis sous forme de solutions concentrées à 10 mM dans du DMSO. Les dosages sont généralement effectués dans des tampons physiologiques contenant de l’Hépes ou du Tris, avec des concentrations en substrat allant de 1 à 100 µM.
La variation relative de la fluorescence est mesurée à une longueur d’onde d’émission de 470 nm pour une longueur d’onde d’excitation de 352 nm. Les faibles artefacts lumineux peuvent être minimisés en utilisant un filtre de coupure de 390 à 450 nm dans le faisceau d’émission. Les solutions de substrat concentrées en DMSO peuvent être encore solides à 4°C et donc doivent être ramenés à température ambiante avant l'utilisation. Ces substrats doivent être également protégés de la lumière. Dans ces conditions, les composés resteront stables pendant plus d’un an.