Substrat fluorogénique ANSN de la thrombine et PCa

PM(g/mol) : 703,73
Km FIIa : 2 µM - Kcat : 110 s-¹
Km FVIIa : 89 µM - Kcat : 0,019 s-¹
Km FVIIa/FT : 52 µM - Kcat : 0,76 s-¹
Km FXa : 160 µM - Kcat : 3,3 s-¹
Km FXIa : 520 µM - Kcat : 92 s-¹
Km PCa : 54 µM - Kcat : 72 s-¹
Km t-PA : 110 µM -  Kcat : 0,71 s-¹

Les propriétés cinétiques identifiées aideront à la sélection d’un substrat approprié.
Les substrats ANSN sont fournis sous forme de solutions concentrées à 10 mM dans du DMSO. Les dosages sont généralement effectués dans des tampons physiologiques contenant de l’Hépes ou du Tris, avec des concentrations en substrat allant de 1 à 100 µM.
La variation relative de la fluorescence est mesurée à une longueur d’onde d’émission de 470 nm pour une longueur d’onde d’excitation de 352 nm. Les faibles artefacts lumineux peuvent être minimisés en utilisant un filtre de coupure de 390 à 450 nm dans le faisceau d’émission. Les solutions de substrat concentrées en DMSO peuvent être encore solides à 4°C et donc doivent être ramenés à température ambiante avant l'utilisation. Ces substrats doivent être également protégés de la lumière. Dans ces conditions, les composés resteront stables pendant plus d’un an.